ADN recombinante en la naturaleza

ALIMENTOS TRANSGÉNICOS

Con respecto a los alimentos transgénicos, lo que se hace es buscar, en un ser vivo (animal, planta, bacteria o virus) un gen que codifique una proteína; como podría ser una una enzima que intervenga en la maduración de los frutos o en la producción de un compuesto inhibidor de multiplicación viral o de una característica estructural u organoléptica, confiriéndole un aumento del contenido de un nutriente o una mayor tolerancia a un herbicida. Este gen se introduce en el material genético del alimento que se desea mejorar o modificar. Con esto se obtienen las características finales deseadas, sin tener que pasar por lentos procesos de selección y cruces de cosechas y de animales que se venía realizando tradicionalmente.

El ADN recombinante puede ser usado para aumentar, disminuir o modificar la cantidad de nutrientes específicos de diferentes vegetales (alimentos). Por ejemplo, existe un arroz transgénico, llamado «arroz dorado», que tiene incorporados 7 genes de distintos vegetales, que le confieren un mayor contenido de betacaroteno y de fierro, útiles para la prevención y manejo de la anemia y ceguera, patologías que son endémicas en algunas zonas del mundo. Con 300g de dicho arroz, se logra cubrir el 50% de los requerimientos diarios de vitamina A y el 50% de los de Fe de adultos

Bibliografía:

http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=s0717-75182003000100003&script=sci_arttext

Más pruebas moleculares para el estudio del Glaucoma

http://www.molvis.org/molvis/v11/a34/

Secuenciación de ADN: muestras de ADN genómico a partir de 90 casos con GPAA y 60 controles fueron seleccionadas por cromatografía líquida desnaturalizante de alto rendimiento de los fragmentos de amplificación por la reacción en cadena de la polimerasa. La secuenciación directa identificó cambios de nucleótidos en un sistema automatizado equipado con una columna DNASep . Los fragmentos se eluyeron con un gradiente lineal de acetonitrilo en acetato de trietilamonio 0,1 M (TEAA), pH 7,0, a un caudal constante de 1,5 ml / min. Las temperaturas de fusión y las condiciones de funcionamiento se predijo mediante NAVIGATOR TM software. Para cada fragmento, los perfiles de elución DHPLC obtenidos se agruparon de acuerdo a la similitud. Secuencias de nucleótidos bidireccionales de al menos 2 muestras de cada grupo se determinaron en un ABI-310 por ciclo de la secuencia con la Terminator kit de secuenciación Big Dye Cycle. El dbSNP base de datos se utiliza como una base de datos de polimorfismos de un solo nucleótido conocidos (SNP) y sus frecuencias.

Revista medica de oftalmología molecular

Bibliografía:
http://www.molvis.org/molvis/v11/a68/

Mecanismos de regulación molecular en el Glaucoma

Nivel Genómico: 
• gen LOXL1: Síndrome pseudoexfoliativo  
• gen MYOC: Glaucoma Juvenil 
• gen CYP1B1: Glaucoma congénito 
• gen OPTN: Glaucoma normotensional
• gen PITX-2, FOXC1: Síndrome de Axenfeld-Rieger 
• PAX6: Aniridia 

Nivel Epigenómico: tocar instrumentos de viento de alta resistencia, el consumo de café, la participación en ciertas posiciones de yoga, vistiendo corbatas estrechas, y el levantamiento de pesas, mientras que otros pueden disminuir la PIO, como el ejercicio físico en general. Los factores nutricionales, como dieta grasas y la ingesta de antioxidantes, y otros factores de estilo de vida, incluyendo el uso de hormonas después de la menopausia y tabaquismo

Nivel Transcriptómico: factor de transcripcion FOXC1 que causa anomlias asociadas al glaucoma

Bibigrafía:
http://www.ioba.es/DOCS/diagnostico%20genetico%20glaucoma.pdf
http://www.iovs.org/content/53/5/2467.full

PCR para la confirmación del Glaucoma

Mediante PCR se puede analizar la región codificante de los exones 2 y 3 del gen CYP1B1. Las condiciones de la PCR para amplificar lo exones 2 y 3 fueron:

·         DNA 500 ng, primers

·         0.4 µM, dNTP’s

·         0.08 mM, MgCl2

·         1.5 mM, buffer 1x

·         Taq Pol 1.5U

·         vol 50 µL.

Desnaturalización: 5 min a 94°C; 30 ciclos de 1min a 94°C;

Alineamiento: 1 min de; 1 min a 72 °C y finalmente 5 min a 72°C.

Para la secuencia del DNA se utilizó un secuenciador ABI Prism.

Los oligonucleótidos utilizados para la amplificación mediante PCR se muestran en el cuadro:

Oligonucleótidos utilizados para la amplificación mediante PCR

 Bibliografia:

http://www.medigraphic.com/pdfs/revmexoft/rmo-2005/rmo052g.pdf